9.伍德氏灯检查法
●预热机器(以产生稳定的光波)
●在暗室中进行检查
鳞屑和局部的药物会导致假阳性的出现,真性皮肤真菌感染会在毛干上出现苹果绿荧光,所有的真菌性感染都应该通过真菌培养来确定。
10 活组织检查
可通过以下方面方法增加皮肤活组织检查的可靠性:
●从不同的代表性区域取几个皮肤活组织样品
●进行所有异常组织的活检
●根据临床病变症状、诊疗效果等方面做出鉴别诊断单,并提交给病理学专家
●积极坚持一个组织病理学报告中包含对病变的描述、鉴别诊断过程进行的依据
●实行皮肤病理学检查是为了增加诊所兽医和训练这些病理学家病变部位的选择
●样品最好是取自原发性皮肤病变部位(脓疱、囊泡、瘀斑、丘疹、红斑)。继发性病变(脱毛、鳞屑、溃疡、糜烂)对诊断可能会有一定的作用但意义不是那么重要。好的取样方案是保证取样至少3处取样以保证能得到更全面的病变类型,一般来说,所有的病变部位都应该进行活组织取样。鼻子和脚垫在取样过程中比较敏感,但是这两个部位通常是自体免疫性皮肤病常受影响的部位,他们的取样需要镇静和全身麻醉。
操作:●组织取样区确定后,应避免该部位再次受到创伤,在取样前禁止清洁表面,因为这个过程有可能会移除对诊断高重要意义的鳞屑和表面的痂。
●皮下注射一定的局麻药,注意不要太过于浅表,因为太浅会造成组织结构变形,利多卡因可能会降低一些感染性微生物的活力,因此应禁止应用于组织团块的培养。
●使用一次性Bakers穿孔器进行活组织检查,将活检穿孔器放于病变处,施加一定的压力,旋转活检穿孔器。一旦穿孔器穿透皮肤全层,移开穿孔器,此时皮肤样品与皮下脂肪相连。
●注意不要损伤皮肤样品,用镊子抓住皮肤样品下层的脂肪,后切除皮肤样品上的脂肪
●如果皮肤较薄或病理学家需要确定真来源,可将样品放于一固定基板上
●样品保存于10%的福尔马林溶液中真他方法:
1. 用手术刀切一椭园形的切口以获得活组织检查样本,该方法主要用于大面积的病变
2. 缝合切口
指活检
1.软指
常见皮肤病检查万法
用8mm长的Bakers穿孔器在指/趾的侧面、爪床的侧面、爪基的侧面进行活检取样,该项技术仅仅适用于爪部比较柔软的情况
●硬指
如果爪比较坚硬,切断第三指/耻,显然,主人一般是不会愿意这样做的,因此,为了降低真他部位的组成的影响,此时可进行悬趾的切除
一旦样品采集完成,立即进行伤口的缝台
培养:
● 打开一个将培养样晶
●去除样品表面所有的脓性分泌物,用新鲜生理盐水清洗病变
●收集新鲜分泌物,后送检到微生物学实验室,这种清洁技术可以降低被污染的
【微生物的数量】●耳部样晶应该在清洗前取样
深部皮肤培养:1.术前准备将要进行取样的组织,用生理盐水冲洗取样部位(消除消毒剂对病原微生物的损伤)
2.用无菌的Backer穿孔器/手术过程取样
3.将样品放于无菌的容器中(滴加一滴新鲜的生理盐水)、冷藏、装样,注意为增加测试的准确性勿冷冻样品.实验室工作人员应进行皮肤组织块培养。
11.PCR技术:
PCR技术在兽医临床门诊上还无法广泛应用,一些实验室利用PCR检测分支杆菌和真菌微生物,因为PCR技术发展非常快速,因此,与诊断实验室的合作对疾病诊断的可靠性具有一定的意义。
12.免疫染色技术:
直接免疫荧光法应用于兽医临床已有30多年的历史,但是该方法的准确性和重复性具有一定的争议性,身体不同的部位对直接免疫荧光法的结果具有很大的影响,脚垫手口鼻样面有11%-78%的假阳性存在。另外,实验室诊断表明存样具有很差的重复性。目前,最新的技术包括免疫过氧化物和单克隆抗体能提供更准确的结果,但是他们的应用高限。
过程:
●通过标准活组织检查技术收集皮肤样品
●将样品放于Michelle's防腐剂中,
●(根据需要)免疫过氧化物酶染色时,将样品放于10%福尔马林中为增加测试的可靠性和样品要求,可与专业的诊断实验室联系。
13.玻片压诊法:
●将载玻片放置于红色病变处,并施加一定的压力
观察施加一定压力于病变处后皮肤颜色的变化,载玻片下的皮肤要么是白色(血液被排出该部位),要么是红色。荨麻疹样病变通常是因为血管扩张引起渗出性变化但是没有红细胞出现,因此,红色病变会在一定压力下呈现白色。瘀斑是因为血液流出血管造成的,在一定压力下病变皮肤仍然是红色的。
14.过敏测试:
血清免疫球蛋白试验:
发生过敏反应的犬其血清免疫球蛋白水平会升高,从而使识别抗原特异性抗体和测定真水平成为一种可能,一些公司已经可以提供这样的测试板,而且在任何环境中都可以进行操作。一般来说,患病动物不需要按照常规的过敏测试所需要的停止给药以免影响结果这一要求。因为这些测试主要是测量免疫反应的成份,因此抗感染药物会对结果杳一定的影响,在进行皮内过敏试验前,停止类固醇激素的给予,一些公司的血清免疫球蛋白测试中包含停止给予类固醇这一要求
皮内过敏测试:
皮内过敏测试是近年来被认为是最好的诊断犬异位性皮炎的黄金规则,被绝大多数皮肤病专家所应用,皮内过敏测试可以让我们对发生过敏反应的皮肤进行检测,大多数动物能够耐受这个过程,并且这个测试结果也比较可信。待检测动物应该给以一定的镇静以减少应激、测试前停止给予抗组胺药10-14天、停止内固醇药物至少4周,所使用的抗原必须要细心保存以保证高质量的测试原料,一般而言,测试中应包含至少40种以上的过敏原以保证足够的过敏原测试范围。
过程:
●给予一定的镇静药物(减少应激)
●用40#的刀片在胸部两侧修剪一定区域,主要不要损伤皮肤
●用记号笔划一网恪状提示注射的部位
●使用特殊的皮内注射器,给予过敏原0.5-0.1ml (被稀释到1000-1500PNU)
●等30min
●评估每个部位的红斑和膨胀程度,使用组肢和生理盐水来对比反应性,根据反应性将红斑和膨胀程度分为0-4级,阳性结果应该看起来像蜜蜂重伤后的表现:在反应的边缘有明显突起。隐形结果会在注射部位出现一定程度的膨胀,但是不会出现红疹和锐性突起。
皮内过敏测试盒血清免疫球蛋白测试的比较:
●在兽医临床,根据过敏检查方法的免疫疗效的比较性研究较少,有限的文献表明,基于血清学过敏测试的治疗真反应效果平均是60%,基于皮内过敏测试的治疗性效果平均是68%,因此,理想的过敏测试应该是同时进行血清免疫球蛋白测试和皮内过敏测试,而临床确实有大夫是这样操作的。
斑点测试:
●主要应用于测定人的过敏实验,在动物上还存在一定的争议性。
15 诊疗性诊断试验
跳蚤过敏性皮炎:
最常见的皮肤疾病之一,通过洗澡可有效移除跳蚤和虱子从而使患病动物的症状出现明显改善,因此,腰部皮炎和所有瘙痒的猫都应该进行跳蚤性皮炎治疗性测试,塞拉菌素、氟虫腈治疗跳蚤性皮炎效果非常好,对跳蚤过敏的动物应该每2-3周进行给药治疗。在跳蚤与虱子等大量存在的环境中,需要花很久的时间才可以降低跳蚤与虱子的数量,此时,主人可能会发现治疗的效果不佳。
猫蠕形瞒病:
由蠕形螨引起,具有传染性,表现脱毛、瘙痒,在美国南部高发,蠕形螨可能难于发现,因此,4-6周给予石硫合剂可以用于猫蠕形瞒病的治疗性诊断。
16.食物过敏测试
没有体外测试,是唯一确定食物过敏引起撞痒的方法。
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